李时珍曾参考历代有关医药及其学术书籍八百余种，结合自身经验和调查研究，历时二十七年编成《本草纲目》一书，是我国明以前药物学的总结性巨著。在国内外均有很高的评价，已有几种文字的译本或节译本。另著有《濒湖脉学》、《奇经八脉考》等书

在长期的医疗实践中，李时珍治好了不少疑难杂症，积累了丰富的医药知识，成为远近闻名的医生。

李时珍三十三岁时，住在武昌的楚王朱英碱听说他医术简明，把他召去，让他以楚王府奉祠正的名义，掌管王府的良医所。后来，因为他治好了朱英碱长子的病，又被推荐到京城太医院任职。太医院是专为宫廷服务的医疗机构，他看不惯官场中乌烟瘴气的情况，不久就托病辞职，回到了家乡。

李时珍在行医过程中，读了许多医药著作。他感到历代的药物学著作存在不少缺点，不但分类杂乱，内容错误，而且还漏载了许多药物，需要重新整理和补充。因此，他决心在宋代唐慎微编的《证类本草》的基础上，编著一部新的完善的药物学著作。